（ 09.20 --09.26 / 2010 ）
美寶國際集團:陶國新 

　　本周動態(tài)包括以下內容： 發(fā)現(xiàn)有望增強癌癥 放療效果的 胞漿型磷脂酶 A2 ； 靶向輸送化療藥物的納米載體； 檢測人體生物鐘的簡單方法； Gfi1b 蛋白調節(jié)骨髓 干細胞的活性；端粒通過 Cdc13 蛋白招募端粒酶維持自身長度 。

1. 發(fā)現(xiàn)有望增強癌癥 放療效果的 胞漿型磷脂酶 A2
【摘要】

　　美國圣路易斯華盛頓大學醫(yī)學院的科學家們近日發(fā)現(xiàn)了一種新的藥物靶點，有望幫助增強頑固癌癥的放射治療效果。研究成果發(fā)表于美國《國立癌癥研究所期刊》。

　　該藥物靶點為胞漿型磷脂酶 A2 （ cPLA2 ），能夠導致血液惡性腫瘤生長，并降低放射治療的療效。“我們最初的想法是找出那些促使肺癌和腦癌對放射療法產生排斥作用的信號分子”，文章的主要作者 Dennis Hallahan 稱，“我們注意到，在開始對腫瘤細胞進行放射性治療不到兩分鐘內，就有 cPLA2 產生，并使腫瘤對放射療法產生抵制”。

　　研究人員由此意識到，如果抑制 cPLA2 ，或許可以加大放射療法治療肺癌和腦癌的療效。于是他們在正常小鼠體內和去除了 cPLA2 產生能力的小鼠體內分別植入腫瘤，然后對其進行放射療法，并比較兩者療效?！巴ㄟ^實驗我們發(fā)現(xiàn)，正常小鼠體內的腫瘤仍如預想般的生長，但在無法產生 cPLA2 的小鼠體內幾乎檢測不到腫瘤?！?Hallahan 說。

　　緊接著，研究人員對基因改造小鼠進行了血管檢查，發(fā)現(xiàn)血管本身沒有任何異常，而更進一步的檢測顯示，控制血液流動的一種可收縮細胞不復存在了。“缺少這種細胞，血管仍然可以在腫瘤中生長，但血液無法流經腫瘤了”， Hallahan 稱，“這意味著癌細胞將得不到營養(yǎng)而無法存活”。

　　研究人員已找到一種現(xiàn)成的藥物可對 cPLA2 產生抑制作用，目前該藥物已經進入第二期測試。接下來，他們將進一步研究 cPLA2 的作用機理，并對該抑制藥物的效果作出評價。（來源 : 科學網 張笑）

【點評】

　　作為目前的三大癌癥治療手段之一，放療的風險和收益一直是個難題，如果有可以提高放療效果的方法，對于降低其劑量減輕對身體正常組織的損害有好處。 胞漿型磷脂酶 A2 的發(fā)現(xiàn)或許會在這方面有幫助。

【原文摘錄】

J Natl Cancer Inst (2010) doi: 10.1093/jnci/djq290

Cytosolic Phospholipase A2 and Lysophospholipids in Tumor Angiogenesis

Amanda G. Linkous , Eugenia M. Yazlovitskaya and Dennis E. Hallahan

Abstract

　　Background Lung cancer and glioblastoma multiforme are highly angiogenic and, despite advances in treatment, remain resistant to therapy. Cytosolic phospholipase A2 (cPLA 2 ) activation contributes to treatment resistance through transduction of prosurvival signals. We investigated cPLA 2 as a novel molecular target for antiangiogenesis therapy.

　　Methods Glioblastoma (GL261) and Lewis lung carcinoma (LLC) heterotopic tumor models were used to study the effects of cPLA 2 expression on tumor growth and vascularity in C57/BL6 mice wild type for (cPLA 2 α +/+ ) or deficient in (cPLA 2 α −/− ) cPLA 2 α, the predominant isoform in endothelium (n = 6–7 mice per group). The effect of inhibiting cPLA 2 activity on GL261 and LLC tumor growth was studied in mice treated with the chemical cPLA 2 inhibitor 4-[2-[5-chloro-1-(diphenylmethyl)-2-methyl-1 H -indol-3-yl]-ethoxy]benzoic acid (CDIBA). Endothelial cell proliferation and function were evaluated by Ki-67 immunofluorescence and migration assays in primary cultures of murine pulmonary microvascular endothelial cells (MPMEC) isolated from cPLA 2 α +/+ and cPLA 2 α −/− mice. Proliferation, invasive migration, and tubule formation were assayed in mouse vascular endothelial 3B-11 cells treated with CDIBA. Effects of lysophosphatidylcholine, arachidonic acid, and lysophosphatidic acid (lipid mediators of tumorigenesis and angiogenesis) on proliferation and migration were examined in 3B-11 cells and cPLA 2 α −/− MPMEC. All statistical tests were two-sided.

　　Results GL261 tumor progression proceeded normally in cPLA 2 α +/+ mice, whereas no GL261 tumors formed in cPLA 2 α −/− mice. In the LLC tumor model, spontaneous tumor regression was observed in 50% of cPLA 2 α −/− mice. Immunohistochemical examination of the remaining tumors from cPLA 2 α −/− mice revealed attenuated vascularity ( P ≤ .001) compared with tumors from cPLA 2 α +/+ mice. Inhibition of cPLA 2 activity by CDIBA resulted in a delay in tumor growth (eg, LLC model: average number of days to reach tumor volume of 700 mm 3 , CDIBA vs vehicle: 16.8 vs 11.8, difference = 5, 95% confidence interval = 3.6 to 6.4, P = .04) and a decrease in tumor size (eg, GL261 model: mean volume on day 21, CDIBA vs vehicle: 40.1 vs 247.4 mm 3 , difference = 207.3 mm 3 , 95% confidence interval = 20.9 to 293.7 mm 3 , P = .021). cPLA 2 deficiency statistically significantly reduced MPMEC proliferation and invasive migration ( P = .002 and P = .004, respectively). Compared with untreated cells, cPLA 2 α −/− MPMEC treated with lysophosphatidylcholine and lysophosphatidic acid displayed increased cell proliferation ( P = .011) and invasive migration ( P < .001).

　　Conclusions In these mouse models of brain and lung cancer, cPLA 2 and lysophospholipids have key regulatory roles in tumor angiogenesis. cPLA 2 inhibition may be a novel effective antiangiogenic therapy.

2. 靶向輸送化療藥物的納米載體

【摘要】

　　北京時間 9 月 23 日消息，據物理學家組織網報道，化療是當前治療癌癥的一種有效方法，不過它也存在一些不良副作用，例如惡心反胃、肝毒性和免疫系統(tǒng)功能下降等。特拉維夫大學的丹·皮爾、利莫納·馬格利特和同事們已經研究出一種可以直接把化療藥物輸送到癌細胞，避免與健康細胞發(fā)生互動的“納米車”，這種方法可在增加化療效果的同時減少副作用。  

　　皮爾解釋說：“這種載具就像集束炸彈?！痹诩{米車的里面是攜帶著化療藥物的納米粒子，它可以把這些化療藥物直接釋放到癌細胞里。據皮爾介紹，這種納米粒子載具可以用來治療多種不同類型的癌癥，例如肺癌、血癌、結腸癌、乳腺癌、子宮癌、胰腺癌，甚至幾種類型的大腦腫瘤。有關這種新納米粒子及其在腫瘤治療方面的應用的論文，發(fā)表在《生物材料》（ Biomaterials ）雜志上。

　　這種藥物輸送平臺的關鍵是用來制造這種集束納米粒子的外殼的分子——透明質酸 (Hyaluronan) 。 透明質酸是一種可被很多類型的癌細胞的受體識別的糖分子 。皮爾說：“當納米載體與癌細胞的受體發(fā)生互動時，受體會發(fā)生結構變化，化療藥物會被直接釋放到癌細胞里。”他解釋說，這一研究結果把化療的更多注意力集中在對抗病變細胞上。

 　　由于納米粒子只對癌細胞起反應，因此周圍的健康細胞不會受到化療的影響 。皮爾表示， 這種納米車本身是用天然油脂分子制成的，納米粒子發(fā)生作用后，會在體內自行分解 ，因此這種療法比當前的化療方法更安全。通過患腫瘤的老鼠進行的試驗發(fā)現(xiàn)，用透明質酸包裹、其內充滿紫杉醇的納米粒子，在阻止腫瘤生長方面比不含紫杉醇 ( 攜帶著紫杉醇的一種白蛋白納米粒子 ) 的納米粒子更有效。（來源：新浪科技 孝文）

【點評】

　　通過納米技術設計具有特異選擇性的藥物載體，是提高化療藥物效果，降低其對健康細胞和組織的危害的有效手段。

【原文摘錄】   Biomaterials Volume 31, Issue 27 , September 2010, Pages 7106-7114

Paclitaxel-clusters coated with hyaluronan as selective tumor-targeted nanovectors

Ilia Rivkin, Keren Cohen, Jacob Koffler, Dina Melikhov, Dan Peer, Rimona Margalit
　　Paclitaxel (PTX) is a widely used anti-tumor agent in the treatment of solid tumors. Lack of selective strategies to target PTX into tumor cells together with poor solubility necessitating detergent, are severe clinical limitations. To address these hurdles, we devised a strategy that utilized PTX insolubility, mixing it with lipids that self-assemble into nanoparticle-like clusters. These clusters were then coated with hyaluronan, a glycosaminoglycan (GAG), and termed PTX-GAGs. These particles, delivered PTX selectively into tumor cells in a CD44-dependent manner. Injected systemically to mice bearing solid tumors, the PTX-GAGs showed high safety profile and tumor accumulation. Tumor progression was exponential upon treatment with free PTX or PTX in albumin nanoparticles (the FDA-approved Taxol ® and Abraxane ® , respectively). Under the same conditions, PTX-GAGs induced tumor arrest and were as potent as a 4-fold higher Taxol ® dose. Our findings suggest GAGs merit further investigation as vehicles for taxanes, and may be applicable as carriers in other therapeutic settings.

3. 一種 檢測人體生物鐘的簡單方法
【摘要】

　　頭發(fā)能夠幫助科學家檢測人體的生物鐘是否與人們的作息時間相一致 。最新的一項研究發(fā)現(xiàn)，頭發(fā)的毛囊能跟蹤人體的生物鐘。這一發(fā)現(xiàn)或許能夠用于治療睡眠紊亂疾病，或者用于評估需要倒夜班的工人的健康問題。之前的研究者一直認為，人體的生物鐘只存在于大腦中。但在上世紀 90 年代末期，科學家發(fā)現(xiàn)了掌管生物鐘的基因之后，人們才開始相信 我們身體中的每個部位都存在著生物鐘 。有關生物鐘的實驗，都是在老鼠身上進行的。人們已經將生物鐘基因同體重增加、吸食大麻引起的時間喪失感等癥狀聯(lián)系了起來。但還沒有人能夠在人身上直接做實驗。這主要是因為要分析這些基因，需要進行一些可能引起人體痛苦的實驗，比如一天中要抽幾次血，或者取下一塊皮膚來進行化驗。

 　　 最近，日本山口大學的 Makoto Akashi 和他的同事找到了一種簡單的方法研究人體的生物鐘活動，他們把注意力集中到了頭發(fā)上。研究者先后化驗了從頭皮或者胡須上拔下來的毛發(fā)，它們含有大量的毛囊細胞。在提取了這些細胞中的 RNA 后，研究者發(fā)現(xiàn)當受試者非常清醒的時候，生物鐘基因的活動達到了高峰；而那些早上醒來最早的被試者，基因達到高峰的時間也最早。接下來，研究小組打破了一些健康人的睡眠規(guī)律，觀察生物鐘的變化情況。在為期 3 周的實驗中，受試者被要求一天比一天睡得晚，然后研究者在受試者醒來的半小時后加一個人工光源來模擬太陽。在 3 周的實驗結束后，受試者比最開始的時候晚睡了 4 個小時，而毛囊中生物鐘基因的活動也相應地發(fā)生了變化，但只推遲了 2.5 個小時。研究人員將這一結果發(fā)表在最新出版的美國《國家科學院院刊》上。

  　　Akashi 的研究小組也在需要輪班工作的工人身上發(fā)現(xiàn)了同樣的現(xiàn)象。這些人需要在第一周的早晨 6 點到下午 3 點上班，第二周則調整到下午 3 點到午夜上班，第三周再變回早晨上班。研究者發(fā)現(xiàn)，生物鐘基因的活動比這些工人的生活規(guī)律延遲了 5 小時之多，這說明 3 周的時間不足以使人體生物鐘適應新的生活節(jié)奏。

  瑞士日內瓦大學的生物學家 Ueli Schibler 表示，通過毛囊來跟蹤生物鐘的活動，能夠幫助科學家更好地監(jiān)測患者的睡眠紊亂或其他生物鐘節(jié)律失調癥狀。因為這些基因能夠控制人體的許多生理活動，比如器官的正常運轉、消化活動等，這個研究成果或許能夠幫助人們解釋許多由生物鐘引起的健康問題。（來源：科學時報 丁佳）

【點評】

　　通過檢測毛囊細胞生物鐘基因的表達跟蹤人體生物鐘的活動，監(jiān)測生物鐘節(jié)律的規(guī)律，對于研究生物鐘對健康的影響以及如何調節(jié)生活節(jié)奏都是有幫助的。而且利用頭發(fā)或胡須的毛發(fā)作為檢測樣本，傷害小又簡單可靠。

【原文摘錄】   PNAS vol. 107 no. 35: 15643-15648

Noninvasive method for assessing the human circadian clock using hair follicle cells

Makoto Akashi , Haruhiko Soma , Takuro Yamamoto , et al.

　　A thorough understanding of the circadian clock requires qualitative evaluation of circadian clock gene expression. Thus far, no simple and effective method for detecting human clock gene expression has become available. This limitation has greatly hampered our understanding of human circadian rhythm. Here we report a convenient, reliable, and less invasive method for detecting human clock gene expression using biopsy samples of hair follicle cells from the head or chin. We show that the circadian phase of clock gene expression in hair follicle cells accurately reflects that of individual behavioral rhythms, demonstrating that this strategy is appropriate for evaluating the human peripheral circadian clock. Furthermore, using this method, we indicate that rotating shift workers suffer from a serious time lag between circadian gene expression rhythms and lifestyle. Qualitative evaluation of clock gene expression in hair follicle cells, therefore, may be an effective approach for studying the human circadian clock in the clinical setting.

4. Gfi1b 蛋白調節(jié)骨髓 干細胞的活性
【摘要】 來源：《血液》 發(fā)布時間： 2010-9-26 13:31:26

　　加拿大蒙特利爾罕見疾病研究所（ IRCM ）造血與癌癥研究部門負責人 Tarik Möröy 博士和他領導的科研小組在美國血液學協(xié)會的《血液》（ Blood ）期刊上發(fā)表論文稱他們發(fā)現(xiàn)了一種 可調控造血干細胞特性的蛋白 ，有可能成為白血病治療的新靶點。造血干細胞移植目前被廣泛應用于惡性血液病、非惡性難治性血液病、遺傳性疾病和某些實體瘤治療?！霸煅杉毎苁拱籽』颊叩脑煅到y(tǒng)重新恢復生成血細胞包括白細胞、紅細胞及血小板，” Möröy 博士說。白血病或其他難治性血液病的患者最初要接受化療，破壞自身的造血系統(tǒng)同時清除體內的異常細胞。造血干細胞通常通過兩種不同的方式用于治療。第一種是化療前從患者處獲得造血干細胞，化療后再將自體干細胞移植給患者稱之為重建造血細胞。 Khandanpour 說：“這種治療方法的一個主要問題是從骨髓和外周血獲得的造血干細胞通常處于休眠狀態(tài)。為了獲得足夠數量的干細胞，不得不將骨髓中的造血干細胞動員釋放到血液中才容易被收集。”

　　第二種方法是從健康供體處獲得造血干細胞，在化療后將它們移植到患者體內。通過外源細胞重建患者造血系統(tǒng)產生血細胞?！暗沁@種治療通常有 10-20% 的失敗機率。由于某些原因會導致移植的造血干細胞無法快速生成新的血細胞，從而引起患者發(fā)生感染和死亡?！?Khandanpour 博士說?！拔覀儼l(fā)現(xiàn) Gfi1b 蛋白可在骨髓中調控干細胞活性 ，” Khandanpour 說：“在小鼠中當我們關閉 Gfi1b 基因編碼時，我們發(fā)現(xiàn)造血干細胞被激活，開始迅速擴增，離開骨髓進入血液中但卻未失去功能。以這種方法操作造血干細胞活血能有效地促進干細胞治療。”研究人員認為 Gfi1b 失活的移植干細胞可加速生成新的血細胞，從而使干細胞治療更有效而降低患者的危險 。但是研究者們對調控干細胞休眠和動員的機制目前還不是很清楚。

　　“我們的下一個目標是詳細研究敲除 Gfi1b 后細胞內的分子機制，更詳細地了解 Gfi1b 調控造血干細胞定位和激活的機制，” Möröy 博士說：“我們的研究將有助于更好地了解干細胞動員和休眠的生物學機制，從而開發(fā)出對移植供體和患者有利的治療方法?！备鶕幽么蟀籽『土馨土鰠f(xié)會的調查，世界上每四分鐘就有一個人被確診患上血癌，而每 10 分鐘就有一個人死于此類疾病。統(tǒng)計顯示每年約有 54000 患上該類疾病。白血病在兒童和 20 歲作用青少年中死亡率遠遠高于其他癌癥。

【點評】

　　發(fā)現(xiàn) Gfi1b 蛋白可在骨髓中調控干細胞活性，促進干細胞休眠。對其作用機制的進一步研究有助于尋找提高白血病治療效果的方法。

【原文摘錄】 Blood 2010 : blood-2010-04-280305v1-blood-2010-04-280305.

Evidence that Growth factor independence 1b (Gfi1b) regulates dormancy and peripheral blood mobilization of hematopoietic stem cells
Cyrus Khandanpour, Ehssan Sharif-Askari, Lothar Vassen, et al.

Donor matched transplantation of hematopoietic stem cells (HSCs) is widely used to treat haematological malignancies, but is associated with high mortality. The expansion of HSC numbers and their mobilisation into the bloodstream could significantly improve therapy. We report here that adult mice conditionally deficient for the transcription factor Gfi1b, show a significant expansion of functional HSCs in the bone marrow and blood. Despite this expansion Gfi1b ko/ko HSCs retain their ability to self renew and to initiate multilineage differentiation, but are no longer quiescent and contain elevated levels of reactive oxygen species (ROS). Treatment of Gfi1b ko/ko mice with N-Acetyl-Cystein (NAC) significanty reduced HSCs numbers indicating that increased ROS levels are at least partially responsible for the expansion of Gfi1b deficient HSCs. Moreover, Gfi1b -/- HSCs show decreased expression of CXCR4 and VCAM-1, which are required to retain dormant HSCs in the endosteal niche, suggesting that Gfi1b regulates HSCs dormancy and pool size without affecting their function. Finally, the additional deletion of the related Gfi1 gene in Gfi1b ko/ko mice is incompatible with the maintenance of HSCs suggesting that Gfi1b and Gfi1 have partially overlapping functions but that at least one Gfi-gene is essential for the generation of hematopoietic stem cells.

5. 端粒通過 Cdc13 蛋白招募端粒酶維持自身長度
【摘要】 來源：《分子與細胞生物學》 發(fā)布時間： 2010-9-25 16:52:22

　　端粒（ telomere ）是真核生物染色體末端的一種特殊結構，其長度反映著細胞復制史及復制潛能，對細胞的分裂起決定作用，因而被稱作細胞壽命的“有絲分裂鐘”。了解端粒維持染色體完整和穩(wěn)定的機制是衰老和癌癥研究領域的關注焦點。費城威斯達研究所的科學家們近日報道了 Cdc13 蛋白關鍵區(qū)域的結構和功能，證實它通過固定在端粒 DNA 上招募復制酶維持端粒長度。研究論文在線發(fā)表于《分子與細胞生物學》（ Molecular and Cellular Biology ）雜志的封面上。  

　　費城威斯達研究所的研究人員證實 Cdc13 蛋白以二聚體形式與 DNA 相互作用進而調控端粒酶作用及端粒的長度。由于這一基本生命過程在進化過程中高度保守，研究人員選擇在酵母基因上開展了實驗研究。研究表明人類 Cdc13 蛋白有可能成為抗腫瘤治療的一個理想的靶點?！?Cdc13 蛋白在維持和延長端粒中發(fā)揮重要的作用，”威斯達基因表達和調控計劃助理教授，該研究的第一作者 Emmanuel Skordalakes 說：“人類 Cdc13 蛋白功能失常有可能導致衰老或是癌癥，因為維持端粒長度是癌細胞獲得永生化的重要方式。”

　　在論文中 Skordalakes 和他的同事們描述了 Cdc13 在端粒復制中的雙重功能。首先，它可募集端粒酶復合物形成端粒末端保護，防止錯誤的染色體融合。此外， Cdc13 還可招募端粒酶和其他的相關蛋白延長端粒長度。

  　　當研究人員誘導 Cdc13 發(fā)生突變使其無法形成二聚體時，可導致端?？s短從而加速酵母細胞死亡。當他們誘導突變抑制 Cdc13 二聚體與結合 DNA 分離則會導致端粒長度過度延長。研究人員認為 Cdc13 是通過調控 DNA 復制酶對端粒發(fā)揮作用。“ Cdc13 在維持端粒特性上發(fā)揮復雜的作用，維持正常細胞分裂與癌癥之間的平衡，” Skordalakes 說。

  　　在細胞分裂中端粒發(fā)揮著重要的“生物時鐘”作用。每次細胞分裂，端?？偸亲钕乳_始復制。但是由于細胞內蛋白質無法復制染色體末端的最后幾個堿基，因而染色體 DNA 每復制一次就丟失一段端粒 DNA 序列，使得端粒逐漸縮短。如果沒有端粒作為緩沖，染色體就有可能會丟失功能基因。基于此威斯達的一位科學家 Leonard Hayflick 在 1961 年提出細胞均存在“壽限”——這就是著名的“海弗利克極限”。

　　2008 年 Skordalakes 實驗室第一次確定了端粒酶催化亞基的三維結構。端粒酶催化亞基可將短 DNA 序列添加到端粒 ，某些特異的尤其是在胚胎發(fā)育過程中的細胞均是通過端粒酶維持端粒長度。成人干細胞、某些免疫系統(tǒng)細胞以及癌細胞的端粒酶活性較高。

　　Skordalakes 發(fā)現(xiàn) Cdc13 二聚體特性決定了蛋白質的核心功能——將端粒酶招募到端粒上。 Cdc13 二聚體存在多個不同親和性的 DNA 結合位點。從而使得 Cdc13 橫跨 DNA ，一部分緊密固定在 DNA 上，另一部分靠近 DNA 鏈末端與端粒酶結合。 Cdc13 的這一特性有助于將端粒酶招募至端粒。 Skordalakes 說：“你可以想象就如同你被懸掛在懸崖的邊緣，一只手比另一只手更有力。你將用有力的手抓住懸崖邊緣，而另一只手伸到口袋里面拿電話。 Cdc13 就是這樣發(fā)揮作用的。”當 Cdc13 與端粒酶相互作用時原先與 DNA 結合的一端放開 DNA ，另一端則形成端粒酶 -Cdc13 復合物與染色體末端緊密結合從而使端粒酶到達端粒位置。“它在發(fā)揮保護作用的同時調控著端粒酶的功能。” Skordalakes 實驗室仍在繼續(xù)探索端粒的復雜生物機制，鑒定端粒延長過程中其他的必需蛋白質。此外，他們也在研發(fā)可阻斷端粒酶和其他相關蛋白適用于癌癥治療的有潛力的小分子抑制劑。

【點評】

　　通過對端粒自我復制機制的越來越深入的了解，或許將來會發(fā)現(xiàn)可以維持端粒長度不變的方法，對于抗衰老和癌癥研究有很大啟示。

【原文摘錄】  Mol. Cell. Biol. doi:10.1128/MCB.00515-10

Cdc13 N-terminal dimerization, DNA binding and telomere length regulation

Meghan T. Mitchell, Jasmine S. Smith, Mark Mason, et al.

The essential yeast protein Cdc13 facilitates chromosome end replication by recruiting telomerase to telomeres, and together with its interacting partners Stn1 and Ten1 protects chromosomes ends from nucleolytic attack, thus contributing to genome integrity. Although Cdc13 has been studied extensively, the precise role of its N-terminal domain (Cdc13N) in telomere length regulation remains unclear. Here we present a structural, biochemical, and functional characterization of the Cdc13N. The structure reveals that this domain comprises an OB-fold and is involved in Cdc13 dimerization. Biochemical data show that Cdc13N weakly binds long, single-stranded, telomeric DNA in a fashion that is directly dependent on domain oligomerization. When introduced into full length Cdc 13 i n vivo , point mutations that prevent Cdc13N dimerization or DNA binding, cause telomere shortening or lengthening, respectively. The multiple DNA binding domains and dimeric nature of Cdc13 offers unique insights into how it coordinates the recruitment and regulation of telomerase access to the telomeres.